LAPORAN PERCOBAAN 8. Kromatografi Lapis Tipis dan Kolom

LAPORAN

PRATIKUM KIMIA ORGANIK I

PERCOBAAN VIII

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN KOLOM

DISUSUN OLEH :

SUCI DESMARANI

(NIM : A1C117081)

DOSEN PENGAMPU :

Dr. Drs. SYAMSURIZAL., M.Si

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2019

VIII. Data pengamatan

8.1. Kromatografi lapis tipis

No.	Sampel	Jarak Noda(cm)	Jarak Eluen (cm)	Rf
1	Buah naga	3,9	4,8	0,8125
2	Bayam	0,3	4,8	0,025
3	Nanas	3,8	4,8	0,79166
4	Bunga kertas	2,5	4,8	0,520
5	Semangka	3,7	4,5	0,8222
6	wortel	3,9	4,5	0,8666
7	pepaya	3,8	4,5	0,8444
8	Kentang	0	4,5	0
9	Tomat	4,1	4,7	0,8723
10	Bunga sepatu	4,0	4,7	0,8510

8.2. Kromatografi kolom

No.	Sampel	Banyak botol	Warna	Hasil TLC
1	Buah naga	6 botol	Bening semua	Tidak ada noda ang bergerak
2	Bayam	4 botol	1  (bening) 2 (Hijau) 3 (hijau pudar ) 4 (bening)	Noda tidak ada yang bergerak tetapi tapi noda 1,2,3 terlihat berwarna kekuningan pada garis bawah plat.
3	Nanas	3 botol	1 (bening) 2 (kuning keruh ) 3 (bening)	Noda tidak tampak dan tidak bergerak
4	Bunga kertas	5 botol	1 ( bening ) 2 ( terdapat seperti minak ) 3 ( agak keruh ) 4 dan 5 (bening )	Noda tidak tampak dan tidak bergerak
5	Semangka	3 botol	1 (bening) 2 ( keruh ) 3 (bening)	Noda tidak tampak dan tidak bergerak
6	wortel	3 botol	1 (bening) 2 ( kuning cerah ) 3 (bening)	Noda 1dan 3 tampak berwarna krim pada garis bawah tapi tidak bergerak
7	pepaya	4 botol	1 (bening) 2 (kekuninga) 3 dan 4 (bening)	Noda satu tak terjadi apa2. Noda 2 dan 4 tampak noda krim pada garis bawah dan pada noda 3 bergerak naik dengan warna krim
8	Kentang	4 botol	1 (bening) 2 ( kuning keruh ) 3 dan 4 (bening)	Noda tidak tampak dan tidak bergerak
9	Tomat	3 botol	1 (bening) 2 (kemerahan) 3 (bening)	Pada noda ketiga berwarna abu2 dan bergrak naik ke atas
10	Bunga sepatu	4 botol	1 (bening) 2 dan 3(keruh) 4 ( keruh pudar )	Noda tidak tampak dan tidak bergerak

IX. Pembahasan

9.1. Kromatografi lapis tipis

Kromatografi  merupakan salah satu teknik analisis di dalam kimia organik khususnya yang biasa digunakan untuk memisahkan campuran zat menjadi komponen-komponen penyusunnya, sehingga masing-masing komponen tersebut dapat dianalisis secara menyeluruh. Terdapat berbagai  jenis kromatografi diantaranya, kromatografi lapis tipis , kromatografi cair, khromatografi gas, kromatografi penukar ion, kromatografi afinitas, dimana semua teknik khromatografi tersebut menggunakan prinsip dasar yang sama http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/.

Pada percobaan kali ini, dilakukan uji kromatografi lapis tipis menggunakan beberapa sampel yang akan diekstrak menggunakan eluen tertentu. Setelah mempersiapkan alat dan bahan dilakukan preparasi sampel diperolehlah ekstrak dari buah naga, bayam, nanas, bunga kertas, semangka, wortel, pepaya, kentang, tomat dan bunga sepatu. Selanjutnya mempersiapkan eluen yang akan digunakan yaitu dengan mereaksikan heksan (nonpolar) dengan etil asetat (semipolar) dengan perbandingan 2 : 1. Dimasukkan ke dalam chamber lalu dijenuhkan dengan cara diaduk dan didiamkan lebih kurang 1 menit agar homogen. Uji pertama yang dilakukan yaitu menggunakan ekstrak buah naga, sampel ekstrak di totalkan dengan menggunakan pipa kapiler (pipa yang telah dibersihkan dengan tisu, direndam dengan metanol untuk membersihkan zat pengotor lalu dipotong dengan karakter sesuai dengan ukuran yang diinginkan). Ekstrak buah naga ditotolkan pada garis bawah plat (plat yang telah diberi tanda batas bawah dan batas atas). Plat tlc dimasukkan pada eluen yang telah disiapkan lalu ditutup. Eluen berada di bawah garis bawah dari sampel yang di totolkan. Ketika eluen bergerak ke atas itu disebut sebagai proses elusi. Ditunggu hingga eluen mendekati garis batas atas lalu diberikan sinar uv untuk melihat pergerakan warna dari sampel. Eluen bergerak cepat berbentuk titik dan diperoleh jarak noda 3,9 cm, jarak eluen 4,8 sehingga diperoleh rf 0,8125. Dilakukan pengulangan pada sampel yang lain.

Selanjutnya dilakukan pada sampel ekstrak bayam, diperoleh jarak noda 0,3 cm jarak eluen 4,8 cm dan hasil rf sebesar 0,025. Hal ini dapat diasumsikan bahwa ekstrak bayam tidak larut sempurna dengan menggunakan eluen heksan : etil aset. Pada sampel ekstrak nanas diperoleh jarak noda sebesar 3,8 cm, jarak eluen 4,8 cm dan diperoleh harga rf 0,7916. Dapat diasumsikan bahwa ekstrak nanas dapat terelusi dengan baik. Pada sampel bunga kertas diperoleh jarak noda 2,5 cm dan jarak eluen 4,8 cm sedangkan harga rf yang diperoleh dari perhitungan yaitu 0,520. Dengan demikian dapat dikatakan hasil elusi cukup baik karena menunjukkan harga rf 0,520. Sampel ekstrak semangka menunjukkan jarak noda sebesar 3,7 cm jarak eluen sebesar 4,5 cm dan jarak rf sebesar 0,822. Ini dapat dikatakan baik karena ditunjukkan oleh angka rf lebih besar dari nanas yaitu 0,822. Pada sampel wortel jarak nada yang ditempuh sebesar 3,9 cm jarak eluen sebesar 4,5 dan hasil rf diperoleh sebesar 0,866.

Dilanjutkan dengan uji pada ekstrak pepaya diperoleh jarak nada sebesar 3,8 cm, jarak eluen sebesar 4,5 cm, harga rf yang diperoleh 0,844. Kemudian pada uji sampel kentang tidak menunjukkan pergerakan noda (0 cm) dan jarak eluen yang ditempuh sebesar 4,5 cm dari hasil perhitungan harga rf 0. Hal ini dapat diasumsikan bahwa ekstrak dari sampel kentang tidak dapat terelusi menggunakan pelarut heksandan etil asetat. Pada ekstrak tomat diperoleh jarak noda 4,1 cm jarak eluen 4,7 cm dan harga rf yang diperoleh 0,872. Pada sampel yang terakhir diuji yaitu bunga sepatu diperoleh jarak noda sebesar 4,0 cm jarak eluen 4,7 cm dan harga rf yang diperoleh sebesar 0,851. Dari percobaan ini menunjukkan bahwa dalam melakukan percobaan klt pemilihan eluen sangat diperlukan agar dapak meng elusi sampel yang ingin kita uji. Dibuktikan dengan sampel bayam dan kentang yang tak terelusi dengan sempurna dengan eluen heksan : etil asetat.

9.2. Kromatografi kolom

Percobaan yang kedua yaitu kromatografi kolom,dimana langkah yang pertama kali kami lakukan adalah dengan Penyiapan kolom à disumbat kapas dan ditetesi n-heksan untuk membersihkan bagian dinding kolom. Silica gel (n-heksan) à dimasukkan ke dalam kolom dipadatkan sampai setengah diketuk menggunakan pensil. persiapan sampel à Cawan petri, dimasukkan sampel buah naga dimasukkan silica gel , kemudian diaduk sampai kering kayak kristal.

setelah kering dimasukkan ke dalam kolom diatas silica gel kemudian baru ditambahkan pelarut, ditunggu sampai ekstrak tersebut melewati silica gel dn pelarut turun kebawah . diratakan, pada bagian bawah kolom diberikan botol kecil dimasukkan sampel. menggunakan pelarut n-heksan ditambah etil asetat (8:4) diperoleh 2 botol tetapi tidak penuh. dibiarkan pelarut turun sampai habis tetapi pelarutnya tidak dapat turun digantilah dengan perbandingan 16 :  2 diperoleh satu botol pelarut. Pada sampel bayam dilakukan hal yang sama seperti percobaan sebelumnya dengan eluen n-heksan : etil asetat (5:10). Terbentuk warna hijau dan diperoleh hasil 4 botol larutan yaitu 1  (bening) 2 (Hijau) 3 (hijau pudar ) 4 (bening). Hasil uji TLC noda tidak ada yang bergerak tetapi tapi noda 1, 2, 3 terlihat berwarna kekuningan pada garis bawah plat.

Sampel nanas digunakan eluen kloroform + etanol (3:1) diperoleh 3 botol larutan dengan warna 1 (bening) 2 (kuning keruh ) 3 (bening) dan hasil TLC yaitu Noda tidak tampak dan tidak bergerak. Sampel bunga kertas dengan pelarut 5 ml kloroform diperoleh 5 botol ektraks dengan warna botol 1 ( bening ) 2 ( terdapat seperti minak ) 3 ( agak keruh ) 4 dan 5 (bening ). Uji plat TLC diperoleh noda tidak tampak dan tidak bergerak. Sampel semangka dengan eluen n-heksan + etil asetat (3:2) diperoleh 3 botol dengan warna botol 1 (bening) 2 ( keruh ) 3 (bening). Uji plat TLC diperoleh noda tidak tampak dan tidak bergerak. Sampel wortel dengan eluen n-heksan + etil asetat (3:2) diperoleh 3 botol dengan warna botol 1 (bening) 2 ( kuning cerah ) 3 (bening) dan uji TLC diperoleh noda 1 dan 3 tampak berwarna krim pada garis bawah tapi tidak bergerak.

Pada sampel pepaya dengan eluen n-heksan + etil asetat (3:2) diperoleh 4 botol dengan warna botol 1 (bening) 2 (kekuninga) 3 dan 4 (bening) hasil uji TLC diperoleh noda satu tak terjadi apa-apa. Noda 2 dan 4 tampak noda krim pada garis bawah dan pada noda 3 bergerak naik dengan warna krim. Sampel kentang dengan eluen kloroform : metanol (3:1) diperoleh 4 botol dengan warna botol 1 (bening) 2 ( kuning keruh ) 3 dan 4 (bening). Hasil uji TLC yaitu noda tidak tampak dan tidak bergerak. Sampel tomat n-heksan + etil asetat  (3:1) diperoleh 3 botol dengan warna botol 1 (bening) 2 (kemerahan) 3 (bening), dan hasil uji TLC noda ketiga berwarna abu-abu dan bergrak naik ke atas. Sampel yang terakhir yaitu bunga sepatu dengan eluen n-heksan + etil asetat (3:1) diperoleh 4 botol dengan warna botol 1 (bening) 2 dan 3(keruh) 4 ( keruh pudar ), hasil uji TLC yaitu noda tidak tampak dan tidak bergerak.

X. Kesimpulan

Berdasarkan hasil percobaan yang dilakukan tentang “kromatografi lapis tipis dan kolom “ yaitu :
1. pemisahan secara kromatografi dapat diartikan sebagai pemisahan suatu zat aktif yang terkandung dalam suatu sampel berdasarkan kemampuan bergerak fasa diam dan fasa gerak.

2. Beberapa jenis teknik kromatografi diantaranya adalah kromatografi kolom, kromatografi kertas, kromatografi lapis tipis ( KLT) dan lain sebgsinya.

3. Kemampuan kromatografi kolom berdasarkan kemampuan proses adsorbsi dan partisi dimana komponen sampel secara selektif di adsorbsi oleh permukaan fasa diam dan komponen sampel secara selektif terpartisi antara eluen dan lapisan cairan tipis yang terikat pada padatan pendukung inert.


4. Prinsip kerja kromatografi lapis tipis yaitu dengan pemisahan sampel berdasarkan perbedaan kepolaran antara sampel dengan pelarut (eluen) yang di gunakan.

XI. Daftar pustaka

Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia. Bandung: ITB Bandung .

http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/

Khopkar, S.M. 2010. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia.

Soebagio, dkk. 2000. Kimia Analitik II. Malang: Universitas Negeri Malang.

Tim Kimia Organik I. 2016. Penuntun Praktikum Kimia Organik I. Jambi : Universitas Jambi

XII. Lampiran

Silica gel yang telah dipadatkan dan tidak pecah.karena jika pecah maka silica gel tersebut tidak bisa digunakan.

Macam-macam ekstrak yang akan digunakan pada proses kromatografi

Proses penyinaran plat TLC menggunakan sinar UV

Proses dilakukan TLC

Proses dilakukan impreknasi

Pertanyaan pascapraktek

• Pada percobaan kromatografi kolom, apa upaya yang bisa kita lakukan untuk memadatkan silica gel?
• Pada percobaan kromatografi kolom apa fungsi dimasukkan pelarut?
• Apa kegunaan dilakukan perbandingan penambahan pelarut pada percobaan kromatografi kolom?